Trong trận đấu tại sân Ariake Tennis Park ngày 27/7, Osaka - người được xếp hạng hạt giống số 2 ở Olympic lần này, đã để thua trước đối thủ Marketa Vondrousova, người Cộng hòa Séc và đang xếp hạng thứ 42 thế giới, với tỷ số hai séc là 1-6 và 4-6. Đây là trận đấu thứ 3 của Osaka trong ba ngày qua.
Trong 2 séc với Vondrousova, Osaka đã mắc tới 32 lỗi giao bóng. Đây là một điều hiếm thấy ở tay vợt đang đứng ở vị trí thứ 2 thế giới này. Trong séc thứ 1, Osaka để đối thủ dẫn trước 0-4. Cô đã cố gắng giành chiến thắng trong game thứ 5, nhưng lại thất bại trong 2 game còn lại. Osaka lấy lại bình tĩnh trong game thứ 1 của séc thứ 2 nhưng không thể duy trì lợi thế đó và cuối cùng phải gác vợt với tỷ số 4-6.
Trong trận đấu này, Vondrousova có tới 11 break-point, trong đó có 5 lần chuyển hóa thành chiến thắng.
